抗原肽

载体蛋白KLH, BSA, OVA偶联-多肽修饰

肽-载体蛋白偶联多用于制备抗多肽类抗体，单独的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反应，而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞，进一步诱导B细胞免疫反应。

请记住，免疫系统是将肽-蛋白作为一个整体来激起免疫反应的，因而产生的抗体中有针对多肽的，有针对链接剂的，也有针对载体蛋白的。 其中 常见的载体蛋白有如下几种:

• KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)，即血蓝蛋白，是在某些软体动物、节肢动物(蜘蛛和甲壳虫)的血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子，与含铁的血红蛋白类似，它易于氧结合，也易与氧解离，是已知的惟一可与氧可逆结合的铜蛋白，氧化时呈青绿色，还原时呈白色。其分子量45０ ０00～１30 000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因而是 常被选用的载体蛋白。


• BSA (Bovine Serum Albumin)，即牛血清白蛋白，属于 稳定的和可溶的白蛋白。其分子量为67 x 103 Da （含有59个Lys）。大约有30-35个主要氨基可用于与链接剂发生共轭反应, 使得BSA成为一种很流行的弱抗原化合物载体蛋白。
  BSA的不利之处在于在很多实验中，它被当作封闭剂使用，如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测分析中，通常会出现假阳性，因为这些血清含有抗BSA的抗体。


• OVA (Ovalbumin)，即鸡卵白蛋白，分子量为45 x 103 Da。它可作为 载体蛋白去验证抗体是否特异性地只针对多肽而并非载体蛋白(如BSA)。

巯基修饰(通过Cys的侧链)用于与KLH、BSA或OVA发生共轭反应

所有携带巯基反应的功能基团经修饰都可被用来发生共轭反应。其中 常见的有以下几种:

• 碘乙酰胺（Iodoacetamide）
• 马来酰亚胺（Maleimide）
• 烷基卤（Alkyl halide）