网站首页
多肽合成服务
多肽修饰服务 |多肽合成技术 |多肽合成特色 |质量控制体系 |增值服务
多肽修饰
N端修饰/C端修饰 |二硫键修饰 |酰胺键成环 |荧光标记 |生物素标记多肽 |载体蛋白偶联和MAPs |非天然氨基酸/D型氨基酸 |磷酸化修饰和磺酸化修饰 |Linker,spacers PEGylation |穿膜肽
新生抗原肽
多肽肿瘤疫苗概念 |新生抗原肽应用 |合生生物新生抗原多肽优势
多肽文库构建
多肽文库构建特点 |多肽文库类型 |合生生物服务特色
技术资源
糖肽技术 |FRET肽技术 |胰岛素合成技术 |订书多肽合成技术 |稳定同位素标记技术 |多磷酸化肽标记技术
化妆品肽
生发类 |美白类 |抗皱类 |抗衰老 |肌肤修复类 |抗过敏,炎症 |抗紫外 |瘦身丰胸类 |祛眼袋类
药物肽
科研用药物肽定制 |仅用于科学研究
目录多肽
多肽服务
促销活动
行业新闻
活动与新闻
多肽FAQS
多肽常识
技术中心
公司概况
工作机会
多肽订购
联系我们
关于合生
在线订购
您的当前位置:首页 > 多肽服务

Fmoc固相多肽合成步骤示例:合成多肽ACDER

Fmoc固相多肽合成步骤示例:合成多肽ACDER

1、合成CTC树脂:称取0.3g CTC Resin(如初始取代度约为1.0mmol/g)和0.4 mmol的Fmoc-Arg(Pbf)-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入树脂0.9 mmol的DIPEA((Mw:129.1,d:0.740g/ml)),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin备用。

2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到H2N-Arg(Pbf)-CTC Resin。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色)

3、缩合:取2.7mol Fmoc-Glu(OtBu)-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再分别加入1.8mol DIPEA,1.67mol HBTU。反应30分钟后,用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Glu(OtBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。

4、依次循环步骤二和步骤三,*终得到H2N-Ala-Cys(Trt)-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,*后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品 Ala-Cys-Asp-Glu-Arg
切割液选择:

1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)


6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

合肥合生生物专注于多肽合成方向研发十余年,从中也积累了丰富的多肽合成经验,也屡次获得合肥市嘉奖与表扬,如有多肽合成方面的需求,可以直接联系小编VX:19956525566,也可百度搜索“合肥合生生物”。

上一篇:C13、N15稳定同位素标记多肽
下一篇:磷脂聚乙二醇修饰多种环肽DSPE-PEG2000-CRGDK
  • 多肽服务
  • 技术资源
  • 关于合生
  • 多肽合成服务
  • 多肽修饰
  • 新生抗原肽
  • 多肽文库构建
  • 技术资源
  • 化妆品肽
  • 药物肽
  • 目录多肽
  • 多肽FAQS
  • 多肽常识
  • 公司概况
  • 工作机会
  • 多肽订购
  • 联系我们
  • 联系方式
    联系人:SynthBio
    联系电话:0551-63802898
    移动电话:19956525566
    地址:合肥高新区杭埠路23号中科资城A区5层
    Email:
    邮编:230088
    公司网址:http://www.synthbio.cn
    QQ:1989272888
Copyright@ 2003-2025  合肥合生生物科技有限公司 版权所有  电话:0551-63802898 传真: 地址:合肥高新区杭埠路23号中科资城A区5层 邮编:230088
         皖ICP备2023008412号-1